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  Photoactivatable xanthone (PaX) dyes enable quantitative, dual color, and live-cell MINFLUX nanoscopy

Remmel, M., Matthias, J., Lincoln, R., Keller-Findeisen, J., Butkevich, A. N., Bossi, M. L., et al. (2024). Photoactivatable xanthone (PaX) dyes enable quantitative, dual color, and live-cell MINFLUX nanoscopy. Small Methods, 8(9): 2301497, pp. 1-9. doi:10.1002/smtd.202301497.

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Urheber

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 Urheber:
Remmel, Michael1, Autor           
Matthias, Jessica1, Autor           
Lincoln, Richard1, Autor           
Keller-Findeisen, Jan, Autor
Butkevich, Alexey N.1, Autor           
Bossi, Mariano L.1, Autor           
Hell, Stefan W.1, Autor                 
Affiliations:
1Optical Nanoscopy, Max Planck Institute for Medical Research, Max Planck Society, ou_2364730              

Inhalt

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Schlagwörter: -
 Zusammenfassung: The single-molecule localization concept MINFLUX has triggered a reevaluation of the features of fluorophores for attaining nanometer-scale resolution. MINFLUX nanoscopy benefits from temporally controlled fluorescence (“on”/“off”) photoswitching. Combined with an irreversible switching behavior, the localization process is expected to turn highly efficient and quantitative data analysis simple. The potential in the recently reported photoactivable xanthone (PaX) dyes is recognized to extend the list of molecular switches used for MINFLUX with 561 nm excitation beyond the fluorescent protein mMaple. The MINFLUX localization success rates of PaX560, PaX+560, and mMaple are quantitatively compared by analyzing the effective labeling efficiency of endogenously tagged nuclear pore complexes. The PaX dyes prove to be superior to mMaple and on par with the best reversible molecular switches routinely used in single-molecule localization microscopy. Moreover, the rationally designed PaX595 is introduced for complementing PaX560 in dual color 561 nm MINFLUX imaging based on spectral classification and the deterministic, irreversible, and additive-independent nature of PaX photoactivation is showcased in fast live-cell MINFLUX imaging. The PaX dyes meet the demands of MINFLUX for a robust readout of each label position and fill the void of reliable fluorophores dedicated to 561 nm MINFLUX imaging.

Details

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Sprache(n): eng - English
 Datum: 2024-02-062023-10-282024-03-182024-09-20
 Publikationsstatus: Erschienen
 Seiten: 9
 Ort, Verlag, Ausgabe: -
 Inhaltsverzeichnis: -
 Art der Begutachtung: Expertenbegutachtung
 Identifikatoren: DOI: 10.1002/smtd.202301497
 Art des Abschluß: -

Veranstaltung

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Entscheidung

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Projektinformation

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Quelle 1

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Titel: Small Methods
Genre der Quelle: Zeitschrift
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Ort, Verlag, Ausgabe: Weinheim : WILEY-VCH
Seiten: - Band / Heft: 8 (9) Artikelnummer: 2301497 Start- / Endseite: 1 - 9 Identifikator: ISSN: 2366-9608
CoNE: https://pure.mpg.de/cone/journals/resource/2366-9608
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